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布魯氏菌試管凝集反應(yīng)試驗(yàn)(SAT)介紹

瀏覽: 139 次 發(fā)布時間:2025-04-10





      

( 布病試管凝集抗原(光滑型) /      布病試管凝集抗原(粗糙型) /       布魯氏菌試管凝集抗原檢測試劑盒 )


1.實(shí)驗(yàn)原理:

試管凝集法:滅活布魯氏菌抗原與待檢血清混合,如果待檢血清中存在布魯氏菌抗體,則發(fā)生肉眼可見的凝集反應(yīng)。

2.設(shè)備及器材:

試管凝集抗原、被檢血清、生理鹽水、1ml 吸管及 10ml 吸管、凝集管、37℃ 保溫箱、試管架;

3.實(shí)驗(yàn)方法:

3.1 被檢血清的稀釋:每份血清用 5 支試管(必要時也可以多于 5 支試管)

第一管加入 2.3mL 生理鹽水,第二管不加,第三、四、五管各加 0.5mL 

吸取被檢血清 0.2mL ,加入第一管中,混勻?;靹蚝?,吸取第一管中血清加入第二管和第三管各 0.5mL ,將第三管混勻,并吸取 0.5mL加入第四管,混勻。從第四管吸取 0.5mL 加入第五管,混勻。再從第五管吸取 0.5mL 棄去。如此稀釋后,從第二管到第五管血清稀釋度分別為 1:12.5,1:251:50,1:100 。

3.2 加入抗原:先以生理鹽水將抗原原液 1:10 稀釋。

稀釋后的抗原加入各稀釋度的血清管(第一管不加,作為血清對照),每管加 0.5mL ,混勻。加入抗原后第二管至第五管,每管總量 1mL ,血清稀釋度從第二管至第五管分別為 1:25,1:50,1:100 和 1:200 ,從第一管再吸出 0.5mL ,剩 1mL 

3.3 對照:陰性血清對照,血清稀釋后加抗原(與被檢血清對照相似);陽性血清對照,其血清稀釋到原有滴度,再加抗原(與被檢血清操作一致,一般選取 個稀釋度);抗原對照,適當(dāng)稀釋的抗原加生理鹽水。

3.4 定比濁管制備:每次試驗(yàn)須配制比濁管作為判定的依據(jù)。配制方法是:取本次試驗(yàn)用的 1:10 稀釋的抗原再作對倍稀釋,即 5mL 稀釋抗原再加 5mL 生理鹽水,混合后按下表配制比濁管。

未標(biāo)題-15.jpg

全部試驗(yàn)管、對照管及比濁管充分振蕩后置 37℃ 溫箱中 20h~22h ,取出后室溫放置 1~2h ,然后以比濁管為標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。

3.5  檢驗(yàn)結(jié)果的解釋

1++++ :  完全凝集,上層液 100% 清亮。

2+++ 幾乎完全凝集,上層液 75% 清亮。

3++ 顯著凝集,液體 50% 清亮。

4有微量凝集,液體 25% 清亮。

5無凝集,液體不清亮。

待測樣本檢測人血清 ≥ 1:100++ 為陽性;待測樣本檢測人血清 <1:100++ 為陰性。

4. 試驗(yàn)現(xiàn)象圖片:

未標(biāo)題-17.jpg











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