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(    百日咳鮑特菌增菌培養(yǎng)檢測(cè)試劑盒（帶拭子）        20T/盒    )

1、操作方法

①樣本采集

根據(jù)采樣要求，使用鼻/咽拭子采集樣本；將采樣拭子放到百日咳鮑特菌樣本采集液中，折斷采樣拭子桿高出部分或按斷點(diǎn)折斷拭子，擰緊蓋子，標(biāo)記樣本信息，冷藏送至實(shí)驗(yàn)室處理。

若標(biāo)本預(yù)計(jì) 48h 內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，可于 2~8℃ 冷藏保存；若標(biāo)本計(jì)劃 1 個(gè)月內(nèi)完成檢測(cè)，可于 -20℃ 低溫凍存；若標(biāo)本需長期保存，可 -70℃ 以下超低溫凍存。低溫保存期間標(biāo)本不可凍融。

(  百日咳鮑特菌樣本采集液   2mL*50支 /盒  )

②樣本處理：

將樣本采集液中的鼻/咽拭子充分?jǐn)D壓 50~80 次或者渦旋震蕩 30s ，讓標(biāo)本中的細(xì)菌均勻分布于采集液。凍存標(biāo)本需解凍溶化后按上述方法混勻使用。處理后的標(biāo)本可進(jìn)行 PCR 鑒定，也可以接種于選擇培養(yǎng)基或增菌培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)。

③樣本增菌：

1）增菌液配制：百日咳鮑特菌增菌液須現(xiàn)用現(xiàn)配，實(shí)驗(yàn)前取所需數(shù)量的基礎(chǔ)增菌液、添加劑 A、添加劑 B，無菌操作放入生物安全柜，溶化后將添加劑 A、B 顛倒混勻瞬時(shí)離心，分別取添加劑 A 20μL、添加劑 B 200μL 加入到 1.8 mL 的基礎(chǔ)增菌液中混勻備用。

注：①實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作；②百日咳鮑特菌增菌液需要現(xiàn)用現(xiàn)配；③添加劑反復(fù)凍融會(huì)降低分離培養(yǎng)效果，建議第一次使用后適當(dāng)分裝凍存。

2）增菌培養(yǎng)：取 200μL 混勻后的采集液，加入到 2 mL 現(xiàn)配的百日咳鮑特菌增菌液中，36±1?C 靜置培養(yǎng) 48 h～72 h。

④平板培養(yǎng)：

平板培養(yǎng)：增菌后充分混勻培養(yǎng)液，取 50-100μL 的增菌液劃線或者直接涂抹于木炭選擇性瓊脂平板上，37±1?C 培養(yǎng) 3～7 天，挑取疑似菌落進(jìn)行鏡檢、生化試驗(yàn)、熒光 PCR 或者質(zhì)譜等方法鑒定。

2、百日咳鮑特菌菌落圖片：

(  銀灰色菌落： 疑似百日咳鮑特菌、副百日咳鮑特菌  )