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(     支原體液體培養(yǎng)基           4mL*20 支 / 盒     )

1、操作方法：

一、肺炎支原體分離培養(yǎng)：

1. 使用支原體樣本采集液采集樣本，將采集的樣本進(jìn)行振蕩混勻；取 200-400 μL 混勻后的樣本采集液加入到支原體液體培養(yǎng)基中，顛倒混勻后，放入 37 ℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，同時(shí)培養(yǎng) 1 支不加樣本的支原體液體培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照；

2. 每天觀察培養(yǎng)基顏色變化，培養(yǎng)基變橙黃，且澄清無沉淀，表明支原體分離培養(yǎng)陽(yáng)性；顏色無變化，可繼續(xù)培養(yǎng)觀察，14 天后仍無顏色變化，且澄清無沉淀，表明支原體分離培養(yǎng)陰性，應(yīng)根據(jù)臨床癥狀及其他檢測(cè)方法綜合判定；培養(yǎng)基變橙黃，但渾濁或有沉淀，樣本可能被污染，可將采集液保存的樣本過濾后重新培養(yǎng)或重新采樣；

(     支原體樣本采集液           2mL*20 支 / 盒  )

二、肺炎支原體增菌培養(yǎng)：

1. 將肺炎支原體分離培養(yǎng)變?yōu)槌赛S色，且澄清無沉淀的培養(yǎng)基立即震蕩混勻，取 200-400  μL 加入到支原體液體增菌培養(yǎng)基中，顛倒混勻后，放入 37 ℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，同時(shí)培養(yǎng) 1 支不加樣本的支原體液體增菌培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照；

2. 每天觀察培養(yǎng)基顏色變化，培養(yǎng)基變橙黃色，且澄清無沉淀，立即進(jìn)行涂板和保菌；

(  支原體液體增菌培養(yǎng)基    10mL*20 支 /  盒  )

三、肺炎支原體涂板：

將肺炎支原體增菌培養(yǎng)變?yōu)槌赛S色，且澄清無沉淀的培養(yǎng)基振蕩混勻，選擇 2~3 個(gè)適宜稀釋度的菌液各 10  μL 加入支原體瓊脂平板中，用接種環(huán)涂布均勻，倒置，放入 37 ℃ 培養(yǎng)箱需氧培養(yǎng) 5~7 天；將支原體瓊脂平板放到電子顯微鏡下進(jìn)行觀察，菌落呈典型“油煎蛋”狀，大小不一，大的直徑超過 1mm ；

(  支原體瓊脂平板    70mm*10 塊 /  包  )

四、肺炎支原體保菌：

將肺炎支原體增菌培養(yǎng)變?yōu)槌赛S色，且澄清無沉淀的培養(yǎng)基放入離心機(jī)，12000 離心力，4 ℃ ，離心 20 min，棄上清，向管中加入 2mL 支原體菌種保存液重懸，重懸菌液按 500  μL 每管分裝于 4 支空凍存管中，做好標(biāo)記，-70 ℃ 及以下冷凍保存。

(  支原體菌種保存液   2mL*20 支   /  盒  )

2、試驗(yàn)現(xiàn)象圖片：（無）

（  圖 1   使用支原體液體培養(yǎng)基對(duì)樣本進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)前/后對(duì)照?qǐng)D片  ）

(  圖 2   使用支原體液體增菌培養(yǎng)基對(duì)分離培養(yǎng)變?yōu)槌赛S色的樣本進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)前/后對(duì)照?qǐng)D片  )