青島中創(chuàng)匯科生物科技有限公司微生物培養(yǎng)基的配制
溶化：
一般應(yīng)放在玻璃器皿或搪瓷齊內(nèi)。加入蒸餾水，隔水加熱以促其溶解，加熱時應(yīng)經(jīng)常攪拌，防止焦結(jié)，待其溶解后補足水分。
在使用干燥培養(yǎng)基時，先將蒸餾水按定量加入容器中，然后稱取一定量培養(yǎng)基干粉放入水中，靜置10—15min，攪拌、振蕩、或延長時間以促進溶解，一般不要熱，必要時加熱，但時間不宜過長，溫度不宜過高，避免某些營養(yǎng)成分被破壞。
校正酸堿度（調(diào)節(jié)pH）：
培養(yǎng)基要有適當(dāng)?shù)膒H。因此測定pH是培養(yǎng)基配制過程中的重要步驟之一，測定pH的標準溫度為25士2℃。調(diào)節(jié)pH可用無菌的1mol/l氫氧hua鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液。當(dāng)調(diào)節(jié)緩沖液的pH時，宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧hua鉀溶液。滅菌后的pH會比滅菌前的pH升高或降低，一般高壓滅菌前培養(yǎng)基的pH會比最終pH調(diào)高0.2左右，滅菌后基本合適。因此對培養(yǎng)基、緩沖液、試劑在滅菌前后的pH均進行測定，并記下每次pH的測定結(jié)果，有助于積累數(shù)據(jù)考察每種培養(yǎng)基、緩沖液、試劑對滅菌程序的耐受性，從而指導(dǎo)滅菌前pH的調(diào)節(jié)。干燥培養(yǎng)基一般已校正過pH，用時也要再驗證。測定時，一般用指示劑滴入培養(yǎng)基觀察其顏色的變化，或用pH計校正，如與所需pH不符，可用以上的酸或堿液加以校正。調(diào)整pH后要加熱過濾，使培養(yǎng)基澄清。
培養(yǎng)基的滅菌：
培養(yǎng)基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌，各種培養(yǎng)基的滅菌時間和壓力，按其成分不同而定。普通培養(yǎng)基采用121℃、103.42kPa滅菌15min，但容器和裝量較大時，應(yīng)延長至20min。含糖培養(yǎng)基115℃、68.85kPa滅菌30min。含糖、血清、雞蛋等培養(yǎng)基可用流動蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min，連續(xù)3d，間歇滅菌。血清或組織液，采用低熱56—58水浴1h，連續(xù)5—6d滅菌，一些遇高溫即被破壞的物質(zhì)如尿素、腹水等，可用細菌過濾器，過濾除菌。高壓滅菌應(yīng)嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行，逐漸加熱，排除滅菌器內(nèi)的空氣，再逐漸升壓保持預(yù)定的壓力和時間，達到全部殺滅微生物。以上的滅菌時間和溫度要經(jīng)過驗證確認，如不同類型培養(yǎng)基混合一起滅菌時宜采用115℃、68.85kPa滅菌30min為好。
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