(一)使用中創(chuàng)匯科雙相培養(yǎng)瓶培養(yǎng)布魯氏菌
(1)培養(yǎng)瓶接種與培養(yǎng) 按照相應(yīng)培養(yǎng)瓶的要求采集 5ml~10ml 的全血注入培養(yǎng)瓶中,放入培養(yǎng)箱中 37℃培養(yǎng)。隔日觀察培養(yǎng)瓶的生長情況,同時(shí)輕緩搖動培養(yǎng)瓶數(shù)次,使液相充分均勻鋪滿固相表面,一般培養(yǎng)不少于4周。亦可使用中創(chuàng)匯科全自動血培養(yǎng)儀配合布病專用培養(yǎng)瓶進(jìn)行全血培養(yǎng)。
(2)分離培養(yǎng) 如發(fā)現(xiàn)固相表面有菌生長,取出培養(yǎng)瓶,在生物安全柜中打開 培養(yǎng)瓶蓋。用接種環(huán)挑取單個菌落接種于血平板或布氏瓊脂斜面上, 37℃培養(yǎng) 24~48 小時(shí),取培養(yǎng)物進(jìn)行布魯氏菌鑒定;如接種 4 周后 未見明顯菌落生長,在生物安全柜中打開培養(yǎng)瓶蓋,抽取培養(yǎng)液 0.5ml 接種于血平板或布氏瓊脂或布病選擇培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng)24-48 小時(shí),若無菌落生長則確認(rèn)為培養(yǎng)陰性,若有菌落生長則進(jìn)行魯氏菌鑒定。
(二)血培養(yǎng)物核酸檢測
1.樣本處理 在生物安全柜內(nèi)取培養(yǎng)后的血培養(yǎng)物 1ml,加入到 1.5mlEP 管 中,100℃加熱 10min,12000rpm 離心 5min,上清即為滅活后的粗 提模板。將粗提模板拿出 P2+實(shí)驗(yàn)室,再采用全自動核酸提取儀或 手工 DNA 核酸提取試劑盒進(jìn)行精提。
2.核酸精提 如使用全自動核酸提取工作站,可把粗提核酸當(dāng)作樣本按照說 明書操作。 如使用手工法提取,參照試劑盒操作(如:QIAamp DNA Blood Mini kit)。
3.實(shí)時(shí)熒光 PCR 檢測:使用中創(chuàng)匯科生產(chǎn)的血液等組織中微量布魯氏菌核酸檢測試劑盒進(jìn)行鑒定。
青島中創(chuàng)匯科生物科技有限公司現(xiàn)已轉(zhuǎn)產(chǎn)投產(chǎn)多種特色產(chǎn)品,其中彎曲菌分離培養(yǎng)檢測試劑、布魯氏菌檢測試劑、全自動血培養(yǎng)儀、兔補(bǔ)體、熒光偏振儀(布魯氏菌強(qiáng)化監(jiān)測項(xiàng)目)等產(chǎn)品自上市以來,獲得了客戶一致好評。
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