開裂原因:
1、瓊脂
①瓊脂本身的質(zhì)量:不同的瓊脂在保水性和彈性方面有差異,彈性好的瓊脂在失水后變薄或縮小,彈性差的瓊脂出現(xiàn)開裂。
②瓊脂使用量:瓊脂過量或瓊脂粉濃度高,導(dǎo)致平板較硬,例如一些低營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,其碳源、氮源基本為無(wú)機(jī)鹽,培養(yǎng)基成分中大部分為瓊脂,這類培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)的話,易造成水分流失而干裂;培養(yǎng)基滅菌之后最好不要放置時(shí)間過長(zhǎng)或者二次溶解,會(huì)減少水份。
③平板生產(chǎn)過程:培養(yǎng)基倒平板時(shí)的溫度一般在49-50℃,一瓶培養(yǎng)基400mL,倒至底部時(shí)培養(yǎng)基已經(jīng)開始凝固,因此需要快速傾倒,倒至底部時(shí)輕輕搖勻;培養(yǎng)基冷卻凝固時(shí),開風(fēng)吹的時(shí)間過長(zhǎng),一般冷卻凝固時(shí)間為15-20分鐘。
2、平板
①平皿本身的質(zhì)量:平皿不平,蓋不嚴(yán),空隙過大,使平板的透氣量過大,能使水分大量揮發(fā),但平皿的密封性過高有可能影響需氧微生物的生長(zhǎng),因此需要根據(jù)實(shí)際情況選擇透氣性合適的平皿。
②傾注的培養(yǎng)基少,平板較薄,易開裂。
3、培養(yǎng)箱
生化培養(yǎng)箱、非隔水式的培養(yǎng)箱、立式培養(yǎng)箱是不停加熱的,用風(fēng)使內(nèi)部的溫度均勻,氣流循環(huán)帶走水分,導(dǎo)致培養(yǎng)室干燥,風(fēng)速太大,容易將平板吹干、吹裂,另外,生化培養(yǎng)箱在制冷時(shí)會(huì)蒸發(fā)水分,為保證溫度波動(dòng)小,會(huì)頻繁加熱制冷,可以試著調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱壓縮機(jī)的啟動(dòng)溫度。
4、效期
新制備的平板一般不容易出現(xiàn)干裂問題,而長(zhǎng)時(shí)間保存的或儲(chǔ)存溫度過高的平板更容易出現(xiàn)干裂現(xiàn)象。
針對(duì)上述原因,分別對(duì)應(yīng)措施:
1、瓊脂
①比較不同廠家的瓊脂質(zhì)量,選擇最優(yōu)廠家。
②培養(yǎng)基配置多加點(diǎn)水,適量降低瓊脂粉濃度,配置過程避免溶解時(shí)間太長(zhǎng),水分揮發(fā)過多。
③尋找合適生產(chǎn)線,不用人工倒平板,恒溫勻速流出,干燥過程避免風(fēng)吹。
2、平板
①檢查平皿的質(zhì)量,選擇透氣性合適的平皿。
②平板倒得稍厚一點(diǎn),按照GB4789要求,傾注融化的培養(yǎng)基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3 mm(直徑90 mm的平皿,通常要加入18 mL~20 mL瓊脂培養(yǎng)基)。如果平板需儲(chǔ)存,或者培養(yǎng)時(shí)間超過48 h或培養(yǎng)溫度高于40℃,則需要傾注更多的培養(yǎng)基。
3、培養(yǎng)箱
①培養(yǎng)箱出廠設(shè)置的風(fēng)速一般是100%的,有些如進(jìn)口培養(yǎng)箱是可以調(diào)風(fēng)速的,一般調(diào)60-70%就可以。
②培養(yǎng)基擺放遠(yuǎn)離風(fēng)扇,也不要放到培養(yǎng)箱的最底部,一定要放在架子上,因?yàn)榈撞康臏囟葧?huì)比較高,蒸發(fā)水份快。
③ISO提到用塑料袋或者保鮮袋包著培養(yǎng)基,但是要留著開口通風(fēng)換氣,開口方向背對(duì)出風(fēng)口;也可以在加樣后,貼上封口膜,再放入培養(yǎng)箱試試,也許會(huì)影響到耗氧,是否影響菌生長(zhǎng),可以做個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)試試看;拿報(bào)紙把平皿擋起來(lái)。
④培養(yǎng)箱底放無(wú)菌水,使用開口大點(diǎn)的容器如托盤、平皿等,及時(shí)添水,避免干涸,保持室內(nèi)濕度;
⑤用細(xì)菌培養(yǎng)箱和霉菌培養(yǎng)箱或沒有鼓風(fēng)系統(tǒng)的小型培養(yǎng)箱,烘箱自帶干燥功能,培養(yǎng)基肯定會(huì)干,資金足夠盡量買恒溫恒濕培養(yǎng)箱。
4、效期
如接單生產(chǎn),避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。冷庫(kù)存放。







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