一、化學(xué)消毒滅菌:通過(guò)液體化學(xué)試劑殺滅微生物繁殖體或芽孢,消毒對(duì)象一般為物體表面、空氣、污染物品等,消毒方式一般為擦洗、熏蒸、浸泡等;
二、物理消毒滅菌:包括壓力蒸汽、紫外線、焚燒、HEPA過(guò)濾除菌等;具體的
1、熱力滅菌法:分為干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。在同一溫度下,后者效力比前者大,這是因?yàn)闈駸嶂屑?xì)菌菌體蛋白較易凝固;濕熱的穿透力比干熱大;濕熱的蒸汽有潛熱存在。水由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)釋放出的潛熱,可迅速提高被滅菌物體的溫度。
(1)干熱滅菌法:①焚燒,是一種徹底的滅菌方法,但僅適用于廢棄物品或尸體等;②灼燒,直接用火焰滅菌,適用于微生物實(shí)驗(yàn)室的接種環(huán)、試管口等的滅菌;③干烤,鼓風(fēng)干燥箱滅菌,一般加熱到160℃-170℃經(jīng)2小時(shí),適用于高溫下不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品,如玻璃器皿、瓷器等。
(2)濕熱滅菌法:①煮沸法,1個(gè)大氣壓下,煮沸的水溫為100℃,一般細(xì)菌繁殖體煮沸5-10分鐘即被殺死。細(xì)菌芽孢常需煮沸1-2小時(shí),才被殺死。水中加入2%碳酸鈉,可提高沸點(diǎn)達(dá)105℃,促進(jìn)細(xì)菌芽孢的殺滅。②巴氏消毒法,用較低溫度殺滅液體中的病原菌,同時(shí)又不影響消毒物品的營(yíng)養(yǎng)成分及香味的消毒方法。加熱61.1-62.8℃半小時(shí)即可,常用于牛奶和酒類等的消毒。③間歇滅菌法(郭霍氏蒸汽消毒),將待滅菌的物品100℃加熱15-30分鐘,殺死其中的細(xì)菌繁殖體,然后將物品置于37℃溫箱中過(guò)夜使芽胞發(fā)育成繁殖體,次日再通過(guò)流通蒸汽加熱,如此連續(xù)3次,可將所有細(xì)菌繁殖體和芽胞全部殺死。針對(duì)有些培養(yǎng)基、牛奶、糖等在100℃以上有效成分易被破壞的產(chǎn)品進(jìn)行滅菌。④高壓蒸汽滅菌法,是滅菌效果最好、目前應(yīng)用最廣的滅菌方法。方法是在一密閉蒸鍋--高壓蒸汽滅菌器內(nèi)進(jìn)行的。通常采用純飽和蒸汽壓為103.4Kpa,溫度達(dá)121℃,維持15-30分鐘,可殺死包括細(xì)菌芽胞在內(nèi)的所有微生物。適用于各種耐熱、體積大的培養(yǎng)基的滅菌,也適用于玻璃器皿、工作服、耐高溫塑料用品等物品的滅菌。
2、輻照:利用輻射進(jìn)行滅菌消毒,可以避免高溫滅菌或化學(xué)藥劑消毒的缺點(diǎn),所以應(yīng)用越來(lái)越廣。
(1)紫外線:紫外線波長(zhǎng)為200-300nm時(shí)具有殺菌作用,其中以260nm最強(qiáng)。紫外線殺菌機(jī)理主要是作用于細(xì)菌DNA,使同一條DNA鏈上相鄰的兩個(gè)胸腺嘧啶共價(jià)結(jié)合而形成嘧啶二聚體,因而改變DNA的分子構(gòu)型,干擾細(xì)菌DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致細(xì)菌的死亡或變異。紫外線穿透力差,故只適用于空氣及不耐熱物品的表面消毒。
(2)應(yīng)用β射線作食品表面殺菌,γ射線用于食品內(nèi)部殺菌。經(jīng)輻射后的食品,因大量微生物被殺滅,再用冷凍保藏,可使保存期延長(zhǎng)。
3、濾過(guò)除菌:采用機(jī)械方法,設(shè)計(jì)一種濾孔比細(xì)菌還小的篩子,做成各種過(guò)濾器。通過(guò)過(guò)濾,只讓液體培養(yǎng)基從篩子中流下,而把各種微生物菌體留在篩子上面,從而達(dá)到除菌的目的。這種滅菌方法適用于一些對(duì)熱不穩(wěn)定的體積小的液體培養(yǎng)基的滅菌以及氣體的滅菌。它的最大優(yōu)點(diǎn)是不破壞培養(yǎng)基中各種物質(zhì)的化學(xué)成分。濾過(guò)除菌主要用于一些不耐高溫滅菌的血清、毒素、抗生素、藥液、空氣等除菌。但是比細(xì)菌還小的病毒仍然能留在液體培養(yǎng)基內(nèi),有時(shí)會(huì)給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)一定的麻煩。濾菌器的種類很多,目前常用的有蔡氏濾菌器、玻璃濾器、薄膜濾器。①高效過(guò)濾除菌,高效過(guò)濾除菌技術(shù)對(duì)空氣中≤0.3um顆粒與微生物的阻留率能達(dá)到99.97%以上,主要用于生物安全柜與生物安全實(shí)驗(yàn)室的空氣凈化除菌。注意必須定期更換高效過(guò)濾器(HEPA),更換前應(yīng)先用甲醛或過(guò)氧乙酸進(jìn)行熏蒸消毒,更換時(shí)嚴(yán)格做好工作人員防護(hù),換下的過(guò)濾裝置裝入密封袋內(nèi)由具有資質(zhì)的單位焚燒處理。







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