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①取36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h的新鮮大腸桿菌斜面，用稀釋液洗下菌苔，適當稀釋配制成試驗用大腸桿菌懸液。

②分別取擬消毒水樣3份，每份500mL，加入大腸桿菌懸液，混勻，制備染菌水樣。每份取適量水樣進行過濾，濾完后，再抽氣5s，關(guān)閉濾器閥門，用無菌鑷子夾取濾膜邊緣，移放在品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基平板上。濾膜的細菌截留面朝上，濾膜與培養(yǎng)基完全緊貼。將平板倒置，放于36℃±1℃，培養(yǎng)48h，計數(shù)濾膜上生長的大腸桿菌數(shù)，應(yīng)在5×10²CFU/100mL~2×10³CFU/100mL。

③在3份染菌水樣中分別加入消毒劑，迅速混勻，使其達到擬消毒濃度。消毒至規(guī)定時間，每份水樣分別移取2份，每份100mL，分別注入裝有相應(yīng)中和劑的無菌三角燒瓶中，以終止消毒作用。然后進行抽濾，方法同消毒前，計數(shù)濾膜上生長的大腸桿菌數(shù)。計數(shù)消毒后每100m水樣中大腸桿菌數(shù)(CFU)。