兔補體與人類補體系統(tǒng)有相似之處，可以作為研究工具來模擬或研究人體內(nèi)的補體激活過程。這有助于深入理解補體系統(tǒng)在宿主防御機制中的作用。兔補體的制備涉及多個步驟，以下是詳細的制備過程：
一、兔補體動物選擇與采血
?選擇動物?：選擇無寄生蟲及未經(jīng)免疫注射過的健康家兔，通常使用8至12周齡的新西蘭白兔和/或加利福尼亞白兔。
?采血?：通過頸動脈取血，將采集的血液放入37℃溫箱中放置1小時，待血塊收縮后，在4℃下以2000r/min離心15分鐘，分離出血清。
二、兔補體補體純化與吸附
?人紅血球吸附?：取適量A型血及B型血，混入ACD保養(yǎng)液中，將紅細胞用鹽水沖洗多次后混合，并以2000r/min離心除去大部分洗滌液。取家兔血清和人體紅血球等量混合，在4℃（冰水中）每10分鐘攪勻1次，持續(xù)1小時，以吸收掉Forssman抗體。
?離心與分裝?：在0℃以2000G再離心10分鐘，將已吸收的上層血清分裝，每支0.5ml，于-20℃或-80℃保存。
三、兔補體補體活力測定
每批補體都需進行活力測定，以確保其質量。常用的測定方法包括淋巴細胞毒試驗等，通過檢測補體在特定反應中的活性來評估其質量。
四、兔補體儲存與使用
?儲存條件?：兔補體體應在-70℃或更低溫度下儲存，并在2-8℃下解凍后使用。避免多次凍融循環(huán)，以免影響補體活力。
?使用前處理?：兔補體體在使用前應在冰上或冷水浴中解凍，切勿使用溫水或熱水解凍。解凍后的補體應盡快使用，避免長時間放置。
魯公網(wǎng)安備37021102001610號