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1、樣本采集

樣本種類(lèi)主要有鼻咽拭子、鼻咽吸取液、血清等?？ㄋ诨虔d咳期早期患者建議采集鼻咽拭子，持續(xù)咳嗽2~3周或以上的患者建議開(kāi)展血清學(xué)檢測(cè)。

2、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

2.1百日咳鮑特菌分離培養(yǎng)

細(xì)菌培養(yǎng)優(yōu)先采集鼻咽拭子,其次為鼻咽吸取液。采集鼻咽拭子后，可直接接種培養(yǎng)基，也可經(jīng)增菌培養(yǎng)后接種，增菌可提高培養(yǎng)陽(yáng)性率。培養(yǎng)基一般為含選擇性添加劑的鮑-金培養(yǎng)基(B-G培養(yǎng)基)或木炭瓊脂培養(yǎng)基(R培養(yǎng)基)平板。如不能立即接種，需將鼻咽拭子放入轉(zhuǎn)運(yùn)管中，4℃冷藏運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，分區(qū)劃線(xiàn)接種后35~37℃培養(yǎng)，每日檢查有無(wú)疑似菌落，連續(xù)觀察3~7d，若無(wú)任何細(xì)菌生長(zhǎng)痕跡，第7d可報(bào)告百日咳鮑特菌陰性。若有疑似菌落生長(zhǎng)，及時(shí)挑取疑似菌落，在不含選擇性添加劑的B-G培養(yǎng)基或R-L培養(yǎng)基平板上進(jìn)行純菌分離培養(yǎng)。

2.2百日咳鮑特菌核酸檢測(cè)

核酸檢測(cè)優(yōu)先采集鼻咽拭子，其次為鼻咽吸取液，也可使用培養(yǎng)接種后的拭子進(jìn)行核酸檢測(cè)。為提高核酸檢測(cè)陽(yáng)性率，建議單獨(dú)采樣。將拭子在無(wú)菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液中洗脫，離心去除上清液，沉渣提取DNA，用于核酸檢測(cè)；如不能立即提取，可-70℃保存?zhèn)溆谩?/span>

2.3血清學(xué)檢測(cè)

適用范圍百日咳鮑特菌血清學(xué)檢測(cè)不適用于嬰幼兒、1年內(nèi)接種含百日咳成分疫苗和既往感染的個(gè)體。

常用的血清學(xué)檢測(cè)方法是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，以雙份血清或單份血清的PT-IgG抗體為檢測(cè)指標(biāo)。

2.4全基因組測(cè)序

全基因組測(cè)序參照國(guó)家致病菌識(shí)別網(wǎng)《細(xì)菌純培養(yǎng)物二代基因組測(cè)序操作規(guī)范》《細(xì)菌純培養(yǎng)物二代加三代基因組測(cè)序操作規(guī)范》執(zhí)行。