(一)布魯氏菌菌種保存
1.配制腦心浸液甘油培養(yǎng)基,分裝于密封的螺口冷凍管或冷凍瓶內(nèi);
2.將鑒定好的布魯氏菌接種于布氏瓊脂斜面,37℃培養(yǎng)24~48小時(shí);
3.在新鮮培養(yǎng)的培養(yǎng)管中加人腦心浸液甘油培養(yǎng)基,配制成約2~3×1010個(gè)細(xì)菌/ml的懸液。
4.每管菌懸液可分裝多管,每管約為0.25~0.5ml,密封后置于冷凍盒中,貯存于-80℃冰箱,長期保存。
5.混懸菌液、分裝菌液的過程中容易造成菌液溢出和氣溶膠。在操作時(shí)小心謹(jǐn)慎,避免管裝過滿,不能超過容積的1/2。在抽取菌液時(shí),動(dòng)作要輕柔。
(二)液體保存的菌種復(fù)蘇
取出冷凍保存的菌種管,在生物安全柜內(nèi)打開菌種保存管,盡快用接種環(huán)刮取冰屑接種于布氏瓊脂斜面培養(yǎng)基上。放置于37℃培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)期間觀察菌株生長情況(牛種菌和綿羊附睪種菌需 5%~10% 的 CO2)。







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