一、測(cè)定液體培養(yǎng)基中活的和已喪失生活能力的細(xì)菌總數(shù)
(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
采用細(xì)菌計(jì)數(shù)器或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在光學(xué)顯微鏡下直接觀察并進(jìn)行計(jì)數(shù);
(2)涂片計(jì)數(shù)法
將已知體積(0.01mL)的待測(cè)樣品,均勻地涂布在載玻片的已知面積內(nèi)(1cm),經(jīng)固定染色后,在顯微鏡下選擇若干個(gè)視野計(jì)算細(xì)菌的數(shù)目。
(3)比濁法根據(jù)菌懸液的透光量間接地測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量。
二、活菌數(shù)量的測(cè)定
(1)平板菌落計(jì)數(shù)法
平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測(cè)樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋后,理論上可以認(rèn)為充分稀釋后其中的微生物可以分散為單個(gè)細(xì)胞,取一定量的稀釋液與冷卻至合適溫度的培養(yǎng)基進(jìn)行混合澆注平板或涂布到已凝固平板上,經(jīng)過(guò)保溫培養(yǎng)后,由每個(gè)單細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖形成肉眼可見的菌落,即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù),根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。
(2)最大概率數(shù)(MPN)
將待測(cè)樣品在定量培養(yǎng)液中進(jìn)行一系列稀釋培養(yǎng)。在一定稀釋度以前的培養(yǎng)液中出現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng),而在這個(gè)稀釋度以后的培養(yǎng)液中不出現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)。將最后3級(jí)有菌生長(zhǎng)的稀釋度稱為臨界級(jí)數(shù),以 3~5次重復(fù)的3個(gè)臨界級(jí)數(shù)求得最大概率數(shù)(MPN),可以計(jì)算出樣品單位體積中細(xì)菌的近似值。
三、薄膜過(guò)濾計(jì)數(shù)法
測(cè)定水與空氣中的活菌數(shù)量時(shí),由于含菌濃度低,則可先將待測(cè)樣品(一定體積的水或空氣)通過(guò)微孔薄膜(如硝化纖維薄膜)過(guò)濾濃縮,然后把濾膜放在適當(dāng)?shù)墓腆w培養(yǎng)基上培養(yǎng),長(zhǎng)出菌落后即可計(jì)數(shù)。







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