熒光偏振儀
熒光偏振(fluorescence polarization, FP)通常定義為:用垂直方向的偏振光激發(fā)熒光分子,然后測發(fā)射偏振光在垂直方向和水平方向的熒光強度。
1926年熒光偏振現象首次被提出。如果被激發(fā)的熒光物質處于靜止狀態(tài),該物質仍將保持原有激發(fā)光的偏振性；如果被激發(fā)的熒光物質處于運動狀態(tài),該物質發(fā)出的偏振光將區(qū)別于原有被發(fā)光的偏振特性,也就是所謂的熒光去偏振現象。
20世紀50年代熒光偏振理論并首次將熒光偏振用于生代分析領域。
早期的熒光偏振研究均以P表示,目前其仍常用于臨床化學和藥物篩選;而A多生物學檢測,是因其便于進行數據分析和解釋某些相關的物理學參數。
20世紀80年代,隨著熒光探針和熒光偏振分析儀器商業(yè)化,熒光偏振技術在生命科學等各個領域扮演越來越市要的角色。
熒光偏振免疫技術
熒光免疫分析法包括：熒光抗體技術和熒光免疫測定分析技術。熒光抗體技術主要用于檢測組織或細胞中抗原；熒光免疫測定分析技術分為：時間分辨熒光免疫測定和熒光偏振免疫測定(FPIA)，用于檢測體液中微量物質。
熒光標記的小分子抗原在溶液中旋轉速度快,熒光偏振光強度小。當熒光標記的小分子抗原與其相成抗體結合后,所形成的大分子在溶液中旋轉速度變慢,熒光偏振光強度增大。FPIA方法依據熒光標記抗原和其抗原抗體結合物之間熒光偏振程度的差異。用競爭性方法直接測量溶液中小分子的含量。例如,將熒光素標記的小分子藥物、含待測末標記的小分了藥物的人體液及該小分子藥物的抗體混和,若體液中待測未標起的小分子藥物濃度低,則標記的藥物分子與抗體結合的就多,由于抗體分子大,所形成的熒光素標記的藥物分子與抗體的結合物體積亦大,旋轉減慢,熒光偏振光做度就高。反之,熒光偏振光強度就低,利用這一原理,用標記藥 物的濃度與對應的熒光偏振值做工作曲線,便可進行定量分析。另外.FPIA方法不僅能減測抗原,也能對抗體進打檢測。
熒光偏振免疫分析技術操作簡單、易于自動化、適于快速篩選可根據不同抗原的特異性進行熒光標記,結合特異性抗體,根據熒光偏振值的變化進行定量分析。目前,熒光偏振免疫分析技術在病原檢測方面已經得到了廣泛應用,國內已有針對各種病原建立的熒光偏振免疫技術的報道。
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