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熒光偏振免疫技術(shù)原理

  熒光偏振免疫技術(shù)原理熒光俯振免疫方法(fluorescence polarization immunoassny FPIA)依據(jù)熒光標(biāo)記抗原和其抗原抗體結(jié)合物之間熒光偏振程度的差異,用競(jìng)爭(zhēng)性方法直按測(cè)量溶液中小分子的含量。

  在反應(yīng)體系內(nèi)加入未標(biāo)記抗原(待測(cè)抗原)和一定量用熒光素標(biāo)記的小分子抗原,使二者與特異性大分子抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。當(dāng)待測(cè)抗原濃度高時(shí),大部分抗體被其結(jié)合,熒光素標(biāo)記的抗原多呈游離的小分子狀態(tài),小分子在液相中轉(zhuǎn)動(dòng)速度較快,測(cè)最到的熒光偏報(bào)程度也較低。反之,大部分熒光素標(biāo)記抗原與抗體結(jié)合,形成大分了的抗原抗體復(fù)合物,檢測(cè)到的熒光偏振程度也較高。熒光偏振程度與待測(cè)抗除濃度呈反比關(guān)系,利用這一原理,可以精確地得知樣品中待測(cè)抗原的相應(yīng)含量。FPIA還可以對(duì)抗體進(jìn)行檢測(cè)。

  熒光偏振與熒光免疫偏振技術(shù)的應(yīng)用由相關(guān)原理可以看出,熒光偏振和FPIA技術(shù)很適合研究分子間相互作用,可用于評(píng)價(jià)、溫度、鹽濃度等對(duì)分子結(jié)合的影響,同時(shí)這項(xiàng)技術(shù)低毒、靈收、快述,樣品可重復(fù)利用等優(yōu)勢(shì),被廣泛向用于環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全監(jiān)督、疾病診擴(kuò)和化學(xué)、生命科學(xué)的相關(guān)分析中。

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