光源 :熒光強度基本隨激發(fā)光強度增強而增強,因此,高能閃爍氙燈的使用大大提高了靈敏度。脈沖氙燈只在測量時閃爍,一方面延長了燈的壽命,另一方 面避免了連續(xù)光源長時間照射引起的光敏樣品的光降解和生物 樣品。
探測器:PMT光電倍增管信噪比大,每個通道只能讀取分立式譜,靈敏度高,疲勞恢復快。CCD面陣式檢測噪音低,信號同步測定,可以讀出一段光譜區(qū)域內(nèi)的連續(xù)光譜CCD,但CCD在響應速度、溫度穩(wěn)定性等方面卻不如PMT。一般以PMT為探測器的光譜儀價格高于CCD光譜儀,常見于以單光子技術為基礎的高端儀器。
分光系統(tǒng)(棱鏡單色器/光柵單色器),一般光柵單色器分辨率較高。另外,分光系統(tǒng)的中的狹縫,是影響分辨率和控制色散的關鍵因素。優(yōu)秀的光譜儀如PE,激發(fā)狹縫為2.5nm,步進為0.1nm。但狹縫也需要和整個系統(tǒng)匹配,如果狹縫小到嚴重影響該光電響應的靈敏度,也就導致光子信號太弱而無法形成有效光譜。
樣品池, 熒光儀用的樣品池需用低熒光的材料制成,通常用玻璃和石英材料,形狀以方形和長方形為宜。
樣品本身,如化合物組合的復雜程度,共軛分子間元素和形態(tài)相似性等,還有溶液的PH值,溫度等。
非線性:熒光發(fā)射與吸收在一定區(qū)間內(nèi)呈線性關系,如果樣本量太大或光路角度沒有最優(yōu)等其他因素導致兩者關系超出線性范圍,就會對量性判定造成很大誤差。
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