多位點序列分型(MLST)是一種基于核酸序列測定的細菌分型方法,通過PCR擴增多個管家基因內(nèi)部片段,測定其序列,分析菌株的變異,從而進行分型。MLST被廣泛應(yīng)用于病原菌、環(huán)境菌和真核生物中。
MLST分析方法:MLST技術(shù)針對看家基因設(shè)計引物對其進行PCR擴增和測序,得出每個菌株各個位點的等位基因數(shù)值,然后進行等位基因圖譜(allelic profile)或序列類型(sequence types,STs)鑒定,再根據(jù)等位基因圖譜使用配對差異矩陣(matrix pair-wise differences)等方法構(gòu)建系統(tǒng)樹圖進行聚類分析。
MLST分析方案設(shè)計要素:(1)選擇經(jīng)過初步篩選的菌株;(2)選擇具有獨特特征的基因位點;(3)設(shè)計用于基因擴增和序列測定的引物。實際運用中,對于已有的成熟MLST方案的細菌,可直接從MLST數(shù)據(jù)(http://pubmlst.org/)中獲取分型方案。







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