虎紅平板的凝集反應(yīng)(RBPT),該試驗(yàn)又稱為班氏孟加拉紅平板凝集試驗(yàn)。由于所用的抗原是酸性(PH3.6-3.9)帶色的抗原,該抗原與被檢血清作用時(shí)能抑制血清中的lgM類抗體的凝集活性,檢查出的抗體是lgG類,因此提高了該項(xiàng)反應(yīng)的特異性。
器材與試劑:虎紅平板凝集抗原、被檢血清、清潔脫脂玻片或有凹形孔的玻片、0.1ml吸管或微量加樣器、混合棒或牙簽。
試驗(yàn)方法:在玻片上加0.03ml被檢血清,然后加入虎紅平板抗原0.03ml,充分混勻,在5分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。
結(jié)果判定:兩種方法,一種是:出現(xiàn)可見的凝集反應(yīng)就判為陽性;另一種用“+”表示凝集程度按下列標(biāo)準(zhǔn)用加號記錄反應(yīng)強(qiáng)度,
++++:出現(xiàn)大的凝聚片或小的粒狀物,液體完全透明,100%凝集;
+++:有明顯的凝聚片,液體幾乎完全透明,75%凝集;
++:有可見的凝聚片,液體不甚透明,50%凝集;
+:液體渾濁,只有少量粒狀物,25%凝集;
-:液體均勻渾濁。
評價(jià):此法簡便、快速、容易操作,適于基層大面積檢疫;
此法有一定敏感性,檢查牛的陽性率稍高于綿羊、山羊;
因?yàn)樵谒嵝原h(huán)境下lgM活性受抑,該法主要是檢查lgG類凝集抗體,所以特異性較好,與補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、二巰基乙醇(2-ME)試驗(yàn)和抗球蛋白(Coomb’s0)試驗(yàn)有較高的吻合率。
該法受制備抗原時(shí)條件影響較大,所以每批制備抗原應(yīng)予以檢查、標(biāo)化方可應(yīng)用。
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