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空腸彎曲菌、結(jié)腸彎曲菌檢驗(yàn)方法(T/CPMA 006-2019)--標(biāo)本及樣品采集、運(yùn)輸及前期處理

瀏覽: 19 次 發(fā)布時(shí)間:2024-07-03

1 腹瀉患者或者健康人糞便標(biāo)本

盡量在患者使用抗生素前無菌采集新鮮糞便標(biāo)本3~5 g(或者黃豆至蠶豆大小),將標(biāo)本直接置于便盒中,冷藏保存(不可冷凍),當(dāng)天送檢。糞便量小于3 g(黃豆大小)、便拭子或者肛拭子,可放入Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基中,冷藏運(yùn)輸,當(dāng)天送檢。便拭子或者肛拭子也可直接放入彎曲菌的增菌液中,冷藏運(yùn)輸,當(dāng)天運(yùn)送實(shí)驗(yàn)室或24 h內(nèi)進(jìn)行增菌培養(yǎng)。

注:腹瀉患者標(biāo)本采集時(shí),黏液便盡量挑取有膿血和黏液部分。使用便拭子采集時(shí),盡量將沾有標(biāo)本的棉簽部分浸入在運(yùn)輸培養(yǎng)基或者保存液的液面以下,采集標(biāo)本后應(yīng)迅速擰緊管口或者蓋口。

2 家禽、家畜及其泄殖腔中糞便標(biāo)本

直接將標(biāo)本置于便盒中運(yùn)輸,或者無菌挑取黃豆粒大小標(biāo)本直接放入裝有1.5 ml的無菌生理鹽水或者PBS緩沖液中,冷藏保存及運(yùn)輸,24 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

3 整禽胴體及分割肉樣品

使用無菌均質(zhì)袋采集整只禽胴體,冷藏運(yùn)輸回實(shí)驗(yàn)室,加入適量的樣品漂洗液淹沒樣品(一般每1 kg樣品加入500 ml樣品漂洗液),置于振蕩器上,100 r/min震蕩15 min,反復(fù)揉搓禽胴體5 min(注意各個(gè)部位均要揉到)。無菌操作取出禽胴體,取2 ml漂洗液進(jìn)行檢測(cè)。如果當(dāng)天不能檢測(cè)可將禽肉樣品浸潤(rùn)在漂洗液中,放置4 ℃冷藏過夜,24 h內(nèi)再次充分揉搓后,取2 ml漂洗液進(jìn)行增菌培養(yǎng)。

取分割肉1塊(大于25 g)放入無菌均質(zhì)袋中,冷藏保存運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室,加入適量樣品漂洗液淹沒樣品,100 r/min震蕩15 min,反復(fù)揉搓樣品5 min,無菌操作取出禽肉,取2 ml漂洗液進(jìn)行增菌培養(yǎng)。

4 蔬菜、水果等樣品

采集一定量的蔬菜或者水果(樣品的采集量可以根據(jù)要求確定或者采集100~150 g),將樣品放入無菌均質(zhì)袋中,加入樣品漂洗液后充分浸潤(rùn)、漂洗(一般每100~150 g樣品加入100 ml樣品漂洗液),置于振蕩器上,100 r/min震蕩15 min,取出樣品,取漂洗液進(jìn)行直接檢測(cè)或者4 ℃低速(1 500~1 900 g)離心10 min,富集污染病原于2 ml增菌液中,進(jìn)行增菌培養(yǎng)。

5 水樣品

廢水取20~50 ml,地面水取100~200 ml,飲用水取1~4 L。無菌容器采集水樣,將水樣用0.22 μm的無菌濾器過濾富集污染病原,或者將水樣4 ℃低速(1 500~1 900 g)離心10 min,富集污染病原于2 ml增菌液中進(jìn)行增菌培養(yǎng)。


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