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多管發(fā)酵法的操作流程相對(duì)簡(jiǎn)單且標(biāo)準(zhǔn)化，主要包括以下幾個(gè)步驟：

樣品采集與處理：首先，需要采集待檢測(cè)的水樣，并根據(jù)水樣的污染程度選擇合適的接種量。這一步驟對(duì)于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有重要影響。

初發(fā)酵實(shí)驗(yàn)：將水樣加入含有乳糖蛋白胨培養(yǎng)基的試管中，并置于37±0.5℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。在這一階段，大腸菌群會(huì)利用乳糖進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)生酸和氣體。初發(fā)酵管24h內(nèi)產(chǎn)酸產(chǎn)氣和48h產(chǎn)酸產(chǎn)氣的均需進(jìn)行平板分離。

平板分離：采用伊紅美藍(lán)瓊脂平板，使大腸菌群產(chǎn)生帶核心的、有金屬光澤的深紫色菌落。 

復(fù)發(fā)酵驗(yàn)證：以上陽性菌落，經(jīng)染色為革蘭氏陰性無芽孢菌者，再次進(jìn)行初發(fā)酵試驗(yàn)，經(jīng)24h培養(yǎng)產(chǎn)酸產(chǎn)氣的，最終確定為大腸菌群陽性結(jié)果。